Jeremiah McDole, PhD, si-a luat doctoratul in neuroimunologie la Universitatea din Cincinnati si si-a petrecut anii postdoctorali intr-o serie de proiecte de cercetare de succes in domeniul imunologiei la Washington University School of Medicine din St. Louis.
Terapia cancerului s-a îmbunătățit dramatic în ultimii ani, până la punctul în care persoanele cu anumite tipuri de boli experimentează remisie cu o frecvență relativă. Având în vedere această rată în creștere a succesului, acum se pune un accent mai mare pe măsurarea și monitorizarea celulelor canceroase rămase după un tratament de succes. Deseori denumită boală reziduală minimă (MRD), prezența și cantitatea relativă a acestor celule pot indica dacă un pacient a obținut un răspuns molecular profund susținut. O astfel de indicație ar putea însemna că pacientul este eligibil să reducă sau să înceteze tratamentul cu teamă minimă de recidivă.
Detectarea și cuantificarea cu precizie a MRD poate fi o provocare. Tehnologiile de imagistică standard de aur nu pot rezolva un număr mic de celule. Oamenii de știință pot detecta MRD prin identificarea cfDNA vărsat în sânge de țesutul canceros, dar multe metode moleculare, cum ar fi tehnicile qPCR adoptate pe scară largă, nu sunt suficient de sensibile pentru a măsura în mod fiabil prezența MRD. De fapt, datele sugerează că MRD măsurabil este sub limita de detecție a qPCR aproximativ jumătate din timp. Cu toate acestea, studii recente demonstrează că o alternativă la qPCR numită droplet digital PCR (ddPCR) este mai sensibilă. Ca atare, este capabil să detecteze în mod robust acidul nucleic din abundență scăzută în biopsiile lichide, oferind în același timp informații critice despre cuantificarea absolută a ADN-ului mutant. Astfel de date pot fi folosite pentru a oferi o înțelegere mai clară a nevoii pacientului de a continua tratament și a riscului de recidivă.
Optimizarea urmăririi biomarkerilor
Dovezile tot mai mari demonstrează valoarea MRD ca marker de prognostic într-o varietate de tipuri de cancer. Cu toate acestea, oamenii de știință trebuie să identifice ținte relevante pentru a distinge cantitatea mică de ADN mutant din biopsiile lichide. Oamenii de știință au stabilit mulți biomarkeri „standard” pentru anumite tipuri de cancer datorită frecvenței cu care apar: de exemplu, EGFR pentru cancerul pulmonar metastatic; KRAS pentru cancerul colorectal, pulmonar și pancreatic; BRAF și NRAS pentru melanomul metastatic; și BCR-ABL1 pentru leucemia mieloidă cronică (LMC). Cu toate acestea, o varietate de mutații pot duce la un singur tip de cancer și, prin urmare, a devenit o practică obișnuită de a secvența tumora unui pacient pentru a găsi mai mulți biomarkeri pentru a urmări prin biopsii lichide în serie.
Monitorizarea regresiei
În cazul LMC, testarea MRD este o componentă bine stabilită a călătoriei unui pacient, deoarece poate indica când este sigur pentru pacienți să întrerupă tratamentul cu inhibitori ai tirozin kinazei (ITK). TKI-urile au fost transformatoare din punct de vedere terapeutic pentru persoanele cu LMC, oferindu-le o speranță de viață relativ normală. Cu toate acestea, aceste medicamente sunt costisitoare și pot limita calitatea vieții unui pacient din cauza unui număr de efecte secundare. Testarea MRD precisă și sensibilă poate indica o limită sigură pentru tratamentul TKI, salvând pacienții de ani de tratamente costisitoare și efecte secundare debilitante .
Demonstrând valoarea sensibilității crescute la testare, dr. Ehab Atallah și colegii săi au efectuat analize MRD pe 172 de pacienți cu LMC în cel mai mare studiu de acest gen din SUA. Persoanele au obținut un răspuns molecular major (adică, niveluri de transcriere BCR-ABL1 sub 0,01 la sută timp de cel puțin doi ani) prin intermediul TKI, indicând că erau eligibili pentru a opri tratamentul. După întreruperea tratamentului, echipa lui Atallah a monitorizat nivelurile MRD folosind ddPCR și qPCR. qPCR a detectat MRD la 28 de pacienți, iar jumătate dintre aceștia au recidivat. Tehnologia ddPCR a detectat încă 56 de pacienți care au avut MRD pe care qPCR nu i-a detectat, iar 36 dintre acești pacienți (64,3 la sută) au recidivat. Între timp, la 87 de pacienți, nici qPCR, nici ddPCR nu au detectat MRD, în timp ce doar nouă dintre acești pacienți (10,3 la sută) au recidivat.
În mod similar, din cauza limitelor de sensibilitate ale tehnologiei, qPCR adesea nu poate informa luarea deciziilor clinice la pacienții cu leucemie cu celule de manta (MCL). Într – un studiu , ddPCR a depășit atât qPCR, cât și citometria în flux pentru detectarea MRD la frecvențe joase ale alelelor variante de 0,01-0,001. Autorii au propus linii directoare pentru utilizarea ddPCR pentru a evalua MRD în cazurile de MCL.
Utilizarea testării MRD continuă să crească pentru cancerele cu tumori solide. De exemplu, într- un studiu pe 150 de pacienți , cercetătorii au profilat tumorile folosind secvențierea de generație următoare și apoi au urmărit doi biomarkeri genetici folosind ddPCR. În urma intervenției chirurgicale, cercetătorii au descoperit că prezența MRD, măsurată cu ddPCR, a prezis recăderea precoce.
Tendințe viitoare
Pe măsură ce dovezile crescânde demonstrează valoarea sa prognostică, utilizarea testării MRD va continua să crească. Cu toate acestea, instrumente extrem de sensibile, cum ar fi ddPCR, trebuie folosite pentru a profita din plin de această tehnică și pentru a oferi valoare maximă în îngrijirea pacientului.
